花生粕是從仁經(jīng)壓榨提煉油料后的產(chǎn)品，而花生粕的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值較高， 其代謝能是粕類(lèi)飼料中zui高的， 粗蛋白質(zhì)含量接近大豆粕，高達(dá)達(dá)48%以上。

可使用沛歐凱氏定氮儀SKD-100及紅外石英消化爐SKD-08S2來(lái)測(cè)定其粗蛋白含量，（若蛋白質(zhì)的含氮量已知時(shí)，則可用此法測(cè)定樣品中蛋白質(zhì)的含量。）

當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)與濃硫酸共熱時(shí)，其中的碳、氫兩元素被氧化成二氧化碳和水，而氮?jiǎng)t轉(zhuǎn)變成氨，并進(jìn)一步與硫酸作用天生硫酸銨。此過(guò)程通常稱為“消化”。但是，這個(gè)反應(yīng)進(jìn)行得比較緩慢，通常需要加進(jìn)硫酸鉀或硫酸鈉以進(jìn)步反應(yīng)液的沸點(diǎn)，并加進(jìn)硫酸銅作為催化劑，以促進(jìn)反應(yīng)的進(jìn)行。消化完成后，在凱氏定氮儀中加進(jìn)濃堿，可使消化液中的硫酸銨分解，游離出氨，借助水蒸汽蒸餾法，將產(chǎn)生的氨蒸餾到一定量、一定濃度的硼酸溶液中，硼酸吸收氨后，氨與溶液中氫離子結(jié)合，使溶液中的氫離子濃度降低，指示劑顏色改變，然后用標(biāo)準(zhǔn)無(wú)機(jī)鹽酸滴定，直至恢復(fù)溶液中原來(lái)的氫離子濃度為止。根據(jù)所用標(biāo)準(zhǔn)鹽酸的量可計(jì)算出待測(cè)物中的總氮量。蛋白質(zhì)的含氮量為16%，即1克蛋白質(zhì)中的氮相當(dāng)于6.25克蛋白質(zhì)，用凱氏定氮法測(cè)出的含氮量乘以6.25,即得樣品中蛋白質(zhì)的含量。 

1 實(shí)驗(yàn)材料 

1.1 器材    

SKD-100凱氏定氮儀 、SKD-08S2紅外石英消化爐（消化爐可以任意選擇消化孔數(shù)，而不影響熱量散失）1.2 試劑
實(shí)驗(yàn)材料
器材
300ml凱氏燒瓶 4個(gè)； 
移液管；錐形瓶； 
試管； 
小玻璃珠 
試劑 
98%濃硫酸分析純； 
35％氫氧化鈉溶液；
2％硼酸溶液； 
標(biāo)準(zhǔn)鹽酸溶液（0.01mol／L）。 
粉末硫酸鉀-硫酸銅混合物 ：K2SO4與CuSO4·5H2O以3：1配比研磨混合。 
混合指示劑（田氏指示劑）：由50ml 0.1％甲烯藍(lán)乙醇溶液與200ml 0.1％甲基紅乙醇溶液混合配成，貯于棕色瓶中備用。 
樣品溶液：配制3mg/ml的牛血清白蛋白溶液作為樣品。 
2.實(shí)驗(yàn)步驟
安裝凱氏定氮儀。 

消化：取4個(gè)300ml凱氏燒瓶并標(biāo)號(hào),各加1顆玻璃珠，在1號(hào)及2號(hào)瓶中各加樣品1ml，催化劑（K2SO4- CuSO4·5H2O）200 mg，濃硫酸5 ml。留意加樣品時(shí)應(yīng)直接送進(jìn)瓶底，而不要沾在瓶口和瓶頸上。在3號(hào)及4號(hào)瓶中各加1 ml蒸餾水和與1、2號(hào)瓶相同量的催化劑和濃硫酸，作為對(duì)照。在透風(fēng)櫥內(nèi)進(jìn)行消化。在消化開(kāi)始時(shí)應(yīng)控制火力，不要使液體沖到瓶頸。待硫酸開(kāi)始分解并放出SO2白煙后，適當(dāng)加強(qiáng)火力，繼續(xù)消化，直至消化液呈透明淡綠色為止。撤掉火力，冷卻至室溫。 （上海沛歐SKD-08S2消化爐可編程設(shè)定消化爐消化樣品的升溫曲線）

蒸餾： 蒸餾器的洗滌：用水洗滌干凈微量凱氏定氮儀，在蒸汽發(fā)生器中加進(jìn)用幾滴硫酸酸化的蒸餾水和幾滴甲基紅指示劑，用這樣的水蒸氣洗滌凱氏定氮儀。約15分鐘后，在冷凝器下端傾斜放好裝有硼酸-指示劑的錐形瓶，繼續(xù)蒸汽洗滌2分鐘，觀察錐形瓶?jī)?nèi)的溶液是否變色，如不變色則證實(shí)蒸餾裝置內(nèi)部已洗滌干凈。移走錐形瓶，停止加熱，打開(kāi)夾子。 （沛歐skd-100可以設(shè)定清洗程序）
蒸餾：設(shè)定取30％的氫氧化鈉溶液10ml，向玻璃杯中加進(jìn)蒸餾水約5ml稀釋液，設(shè)定蒸餾時(shí)間5分鐘，開(kāi)始蒸餾。氨氣進(jìn)進(jìn)錐形瓶，瓶中的酸溶液由紫色變成綠色。再繼續(xù)下一個(gè)蒸餾操縱。待樣品和對(duì)照均蒸餾完畢后，同時(shí)進(jìn)行滴定。 
滴定：用0.01mol／L的標(biāo)準(zhǔn)鹽酸溶液滴定各錐形瓶中收集的氨量，硼酸指示劑溶液由綠色變淡紫色為滴定終點(diǎn)。 
結(jié)果計(jì)算： 
其中：
A為滴定樣品用往的鹽酸溶液均勻ml數(shù)；
B為滴定對(duì)照液用往的鹽酸溶液均勻ml數(shù)；
C為所取樣品溶液的ml數(shù)